NCI-N87-RFP-Puro穩(wěn)轉(zhuǎn)株是 1976 年從一名男性胃癌患者的胃部分離出來的，具有上皮形態(tài)，在胃癌研究中被廣泛應(yīng)用。NCI - N87 - RFP - Puro 穩(wěn)轉(zhuǎn)株是在 NCI - N87 細(xì)胞的基礎(chǔ)上構(gòu)建的。通過將攜帶 RFP（紅色熒光蛋白）基因和 Puro（嘌呤霉素抗性）基因的載體導(dǎo)入 NCI - N87 細(xì)胞

NCI-N87-RFP-Puro穩(wěn)轉(zhuǎn)株

英文名稱	NCI-N87-RFP-Puro polyclonal stable cell line
產(chǎn)品貨號	XY-H1528
中文名稱	RFP 標(biāo)記的 NCI-N87 穩(wěn)轉(zhuǎn)株
Lot number	NCI-N87-10A2P
細(xì)胞規(guī)格	復(fù)蘇細(xì)胞 (T25細(xì)胞瓶) 或1 × 106 細(xì)胞凍存細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
生長特性	貼壁生長
細(xì)胞株 構(gòu)建流程	（1）構(gòu)建目的基因過表達(dá)慢病毒重組質(zhì)粒，并包裝慢病毒； （2）慢病毒以合適的MOI值轉(zhuǎn)導(dǎo)靶細(xì)胞； （3）用最佳濃度藥物對細(xì)胞株進(jìn)行篩選，獲得混合穩(wěn)轉(zhuǎn)株； （4）穩(wěn)轉(zhuǎn)株質(zhì)檢（COA）。
完全培養(yǎng)基	RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（選擇添加）
培養(yǎng)條件	(1) 氣相：95%空氣，5% CO2；(2) 溫度：37 ℃。
細(xì)胞凍存	無血清凍存液
存儲條件	液氮

背景信息：NCI - N87 細(xì)胞是 1976 年從一名男性胃癌患者的胃部分離出來的，具有上皮形態(tài)，在胃癌研究中被廣泛應(yīng)用。NCI - N87 - RFP - Puro 穩(wěn)轉(zhuǎn)株是在 NCI - N87 細(xì)胞的基礎(chǔ)上構(gòu)建的。通過將攜帶 RFP（紅色熒光蛋白）基因和 Puro（嘌呤霉素抗性）基因的載體導(dǎo)入 NCI - N87 細(xì)胞，經(jīng)過篩選和穩(wěn)定培養(yǎng)，得到了能夠穩(wěn)定表達(dá) RFP 且對嘌呤霉素具有抗性的細(xì)胞株。

構(gòu)建方法：通常使用慢病毒感染法構(gòu)建該穩(wěn)轉(zhuǎn)株。先構(gòu)建包含 RFP 基因和 Puro 抗性基因的慢病毒載體，然后將其包裝成慢病毒顆粒。用慢病毒顆粒感染 NCI - N87 細(xì)胞，病毒進(jìn)入細(xì)胞后，其基因組整合到 NCI - N87 細(xì)胞的染色體中，使細(xì)胞獲得穩(wěn)定表達(dá) RFP 和抵抗嘌呤霉素的能力。之后，利用嘌呤霉素進(jìn)行篩選，只有成功導(dǎo)入并穩(wěn)定表達(dá)抗性基因的細(xì)胞才能存活，從而得到 NCI - N87 - RFP - Puro 穩(wěn)轉(zhuǎn)株。

應(yīng)用領(lǐng)域：在細(xì)胞生物學(xué)研究中，可利用 RFP 的熒光特性，通過熒光顯微鏡等技術(shù)對細(xì)胞進(jìn)行實時觀察和追蹤，了解細(xì)胞的生長、增殖、遷移和分化等過程。在抗腫瘤藥物研發(fā)中，可用于評估藥物對腫瘤細(xì)胞的作用效果。通過觀察 RFP 的表達(dá)變化以及細(xì)胞的存活情況，判斷藥物對 NCI - N87 細(xì)胞的生長抑制、凋亡誘導(dǎo)等作用。還可將其接種到動物模型中，建立腫瘤模型，研究腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移機(jī)制，以及評估抗腫瘤藥物在體內(nèi)的療效。

培養(yǎng)條件：一般使用 RPMI - 1640 培養(yǎng)基，添加 10% 的胎牛血清和 1% 的雙抗（青霉素 - 鏈霉素）。為了維持穩(wěn)轉(zhuǎn)株的穩(wěn)定表達(dá)，培養(yǎng)基中還需要添加適量的嘌呤霉素，濃度通常在 0.5 - 1 μg/ml 左右，具體濃度需根據(jù)實驗情況進(jìn)行優(yōu)化。培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5%CO₂  的恒溫培養(yǎng)箱。

僅用于科研，不能用于臨床診斷！所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于人或動物的治療等任何其他用途，不為任何個人提供產(chǎn)品和服務(wù)。

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