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ECA109-Puro+ffluc穩(wěn)轉(zhuǎn)株
英文名稱(chēng) | ECA109-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
產(chǎn)品貨號(hào) | XY-H2288 |
中文名稱(chēng) | ffluc 標(biāo)記的 ECA109 穩(wěn)轉(zhuǎn)株 |
Lot number | ECA109-24D3P |
細(xì)胞規(guī)格 | 復(fù)蘇細(xì)胞 (T25細(xì)胞瓶) 或1 × 106 細(xì)胞凍存細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞株 構(gòu)建流程 | （1）構(gòu)建目的基因過(guò)表達(dá)慢病毒重組質(zhì)粒，并包裝慢病毒； （2）慢病毒以合適的MOI值轉(zhuǎn)導(dǎo)靶細(xì)胞； （3）用最佳濃度藥物對(duì)細(xì)胞株進(jìn)行篩選，獲得混合穩(wěn)轉(zhuǎn)株； （4）穩(wěn)轉(zhuǎn)株質(zhì)檢（COA）。 |
完全培養(yǎng)基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（選擇添加） |
培養(yǎng)條件 | (1) 氣相：95%空氣，5% CO2；(2) 溫度：37 ℃。 |
細(xì)胞凍存 | 無(wú)血清凍存液 |
存儲(chǔ)條件 | 液氮 |
構(gòu)建原理：通過(guò)將包含目的基因（如 ffluc）以及篩選標(biāo)記基因（如 Puro，嘌呤霉素抗性基因）的外源 DNA 克隆到載體上，然后利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染或病毒轉(zhuǎn)染等方法將重組載體導(dǎo)入 ECA109 細(xì)胞中。外源 DNA 整合到細(xì)胞染色體中，并能隨細(xì)胞分裂穩(wěn)定傳遞下去，再用嘌呤霉素進(jìn)行篩選，獲得穩(wěn)定表達(dá)目的基因的細(xì)胞株，即 ECA109 - Puro + ffluc 穩(wěn)轉(zhuǎn)株。
相關(guān)應(yīng)用：
腫瘤學(xué)研究：可用于研究食管癌細(xì)胞在體內(nèi)外的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為。例如，將穩(wěn)轉(zhuǎn)株接種到動(dòng)物模型中，通過(guò)檢測(cè) ffluc 的表達(dá)情況，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)腫瘤細(xì)胞在動(dòng)物體內(nèi)的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)、轉(zhuǎn)移部位以及對(duì)治療的反應(yīng)，為食管癌的發(fā)病機(jī)制研究和治療策略開(kāi)發(fā)提供重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
藥物研發(fā)：作為藥物篩選的細(xì)胞模型，評(píng)估不同藥物對(duì)食管癌細(xì)胞的抑制作用或靶向治療效果。通過(guò)觀(guān)察藥物處理后穩(wěn)轉(zhuǎn)株中 ffluc 的表達(dá)變化以及細(xì)胞的存活、增殖情況，篩選出具有潛在抗癌活性的藥物，為食管癌的臨床治療提供候選藥物。
基因功能研究：如果 ffluc 基因與某些特定的細(xì)胞信號(hào)通路或生物學(xué)過(guò)程相關(guān)，那么該穩(wěn)轉(zhuǎn)株可用于深入探究這些基因在食管癌細(xì)胞中的功能及作用機(jī)制，有助于揭示食管癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制。
培養(yǎng)與維護(hù)：在培養(yǎng) ECA109 - Puro + ffluc 穩(wěn)轉(zhuǎn)株時(shí)，需要使用適合 ECA109 細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，通常為 RPMI - 1640 培養(yǎng)基，添加 10% - 20% 的胎牛血清以及適量的抗生素（如青霉素、鏈霉素）以防止污染。培養(yǎng)條件一般為 37℃、5%CO2 的恒溫培養(yǎng)箱。在傳代過(guò)程中，要注意控制細(xì)胞的接種密度和傳代時(shí)機(jī)，避免細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)或密度過(guò)高導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不佳。同時(shí)，為了維持穩(wěn)轉(zhuǎn)株的穩(wěn)定性，在培養(yǎng)過(guò)程中可能需要持續(xù)添加嘌呤霉素進(jìn)行篩選壓力，以確保細(xì)胞能夠穩(wěn)定表達(dá) ffluc 基因。
僅用于科研，不能用于臨床診斷！所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于人或動(dòng)物的治療等任何其他用途，不為任何個(gè)人提供產(chǎn)品和服務(wù)。
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